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液相色谱仪的使用具有哪些要求呢?

发布时间2019-06-03        浏览次数:1003

液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如,纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。那么液相色谱仪的使用具有哪些要求呢?

1、气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。

2、如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。

3、使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。

4、长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如,甲醇等),因为,纯水易长霉。

5、要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。

6、换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的

流动相中。换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。

7、流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或细的膜过滤)

8、流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。

9、不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。

10、每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。

11C18柱不能进蛋白样品,血样、生物样品。

12、堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗,清洗方法:

1)以异丙醇作溶剂冲洗;

2)放在异丙醇中间用超声波清洗;

3)用10%稀硝酸清洗。