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使用液相色谱仪不可忽略的一些细节

发布时间2019-04-15        浏览次数:934

    仪器的使用问题不容忽视,以下是使用液相色谱仪不可忽略的一些细节,大家务必多加留意!
    1、不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
    2、使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20mL以上。
    3、气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
    4、如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。
    5、要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
    6、换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
    7、长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如,甲醇等),因为,纯水易长霉。
    8、每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
    9、流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45μm或细的膜过滤)。 
    10、流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
    11、C18柱不能进蛋白样品,血样、生物样品。
    12、堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗,清洗方法:
    (1)以异丙醇作溶剂冲洗;
    (2)放在异丙醇中间用超声波清洗;
    (3)用10%稀硝酸清洗。